AccuPrep® Genomic DNA Extraction Kit (100 reactions)

제품 개요

특장점

혈액, 동물 조직, 배양 세포 등 다양한 샘플 시료로부터 고순도, 고수율의 genomic DNA 추출 가능
동물 조직 세포를 위한 최적화된 Lysis Buffer (TL Buffer) 제공
최대 30 µg의 높은 binding capacity를 갖는 silica based DNA binding column 사용
Washing buffer에 ethanol이 첨가되어 있어 편리하게 사용 가능

응용 분야

• Gene cloning

• PCR

• Real-time PCR

• Southern blotting

• SNP genotyping

제품 규격/사양

▶ 제품 규격/사양

시료 종류	시료 양	DNA 수율	순도^*
Whole blood	200 µl	3 - 6 µg	A_260/280 > 1.8
Buffy coat	200 µl	15 - 20 µg
Cultured cells	10⁴ - 10⁸ cells	15 - 20 µg
Mammalian tissue	25 - 50 mg	10 - 15 µg

^* 시료의 종류에 따라 측정 값의 차가 있을 수 있습니다.

▶ 구성품

구성품	K-3032
TL Buffer (Tissue Lysis)	35 ml X 1 ea
GB Buffer (Binding)	30 ml X 1 ea
WA1 Buffer (1^st Washing)	40 ml X 1 ea
W2 Buffer (2^nd Washing)	80 ml X 1 ea
EA Buffer (Elution)	25 ml X 1 ea
RNase A powder, lyophilized	24 mg X 2 ea
Proteinase K, lyophilized	25 mg X 2 ea
AccuPrep^® Binding Column-I	100 ea
Collection tubes (for filtration)	100 ea
1.5 ml Tubes (for elution)	100 ea
사용설명서	1 ea

▶ 작업 순서

▶ 실험 자료

Figure 1. Gel electrophoresis of whole blood genomic DNA

- Lane M1; Molecular weight marker, λ DNA/EcoR l + Hind lll markers (Cat. No. D-1070, Bioneer)
- M2; Molecular weight marker, 1 kb ladder (Cat. No. D-1040, Bioneer)
- Lane 1; whole blood genomic DNA of two individual mice
- Lane 2; whole blood genomic DNA of two individual rats
- Lane 3; whole blood genomic DNA of two persons.
* 100 ng of intact DNA (left) and Hind III (E-1721, Bioneer) enzyme digested DNA (right)

Figure 2. PCR with p53 primer set after genomic DNA purification

- Lane M; Molecular marker, 100 bp ladder (D-1030, Bioneer)
- Lane 1~8; PCR product with p53 primer set

◈ Quality Assurance

Bioneer is the holder of Quality Management System Certificates for the following standards.

• ISO 9001 – certificate

주문 정보

카탈로그 번호	제품명	규격	가격
K-3032	AccuPrep^® Genomic DNA Extraction Kit	100 reactions	₩K-3032
KB-0111	Proteinase K Powder	25 mg X 2	₩KB-0111

자주 묻는 질문들

Proteinase K 사용법을 알고 싶습니다.

1 vial에 들어있는 25 mg의 Proteinase K를 1.25 ml의 nuclease-free water에 용해 후, 1 rxn 당 20 µl씩 사용합니다. 용해 후에는 4℃에서 보관해야 하며, 장기보관 시, 소량 분주하여 -20°C에서 보관을 권장 드립니다. 자세한 사항은 제품 매뉴얼을 참고해주시기 바랍니다.

타사 Proteinase K 사용 가능한가요?

사용 가능하며, final concentration 맞춰서 사용해야 합니다.

Proteinase K의 unit은 어떻게 되나요?

30 U/mg 이상입니다.

Elution buffer 조성은 어떻게 되나요?

10 mM Tris-HCl (pH 8.0) 입니다. 기타 buffer에 대한 조성확인은 홈페이지 제품 페이지의 관련 문헌/자료 탭의 MSDS에서 확인 가능합니다.

실험 과정 중, 중간에 멈추고 냉동보관 가능한 과정이 있나요?

GB buffer 처리 후 ethanol 첨가 전에서 냉동 가능하며(-80°C), WA1 buffer 처리 후 냉장보관이 가능합니다(짧은 시간 보관 시 추천).

FFPE sample에서 gDNA 추출이 가능한가요?

Xylene을 이용하여 전처리 후, animal tissue protocol로 DNA 추출이 가능합니다.

박테리아 gDNA 추출이 가능한가요?

Gram-negative, gram-positive 박테리아 모두 가능합니다. Gram-positive 박테리아의 경우, 별도의 Lysis Buffer가 필요하며 lysozyme 전처리 후 추출 가능합니다(Lysis buffer 조성: 20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 2 mM EDTA, 1.2% Triton^® X-100/Lysozyme dissolve solution: D.W.).

Gram-positive 박테리아에 lysozyme을 반드시 처리해야 하나요?

Gram-positive박테리아의 세포벽의 주성분인 peptidoglycan을 분해하기 위해 lysozyme이 필요합니다.

Fungi gDNA 추출이 가능한가요?

AccuPrep^®/MagListo™ Plant genomic DNA Extraction kit를 활용할 수 있으며, zymolyase(Lyticase)를 통한 전처리 후에 추출 가능합니다. (zymolyase(Lyticase)은 fungi cell wall의 주성분인 β-glucan을 분해합니다)

Yeast gDNA 추출이 가능한가요?

Zymolyase를 이용하여 전처리 후, 추출 가능합니다. (Zymolyase(Lyticase)은 fungi cell wall의 주성분인 β-glucan을 분해합니다)

플랑크톤 gDNA 추출이 가능한가요?

동물 플랑크톤은 AccuPrep^®/MagListo™ Genomic DNA Extraction Kit의 animal tissue protocol로 추출 가능하며, 식물 플랑크톤은 AccuPrep^®/MagListo™ Plant Genomic DNA Extraction Kit를 사용하여 추출 가능합니다.

Soil에서 gDNA 추출이 가능한가요?

현재 자사에는 가능한 제품이 없습니다만

TL Buffer를 토양과 동일 부피로 혼합한 뒤, Proteinase K를 (400 ug) 넣고, 10분 이상 60℃에서 가열
혼합물과 동일 부피의 Phenol/chloroform/isoamyl alcohol을 넣고 1분간 vortex하여 혼합
상층액만 분리하여, 동일부피의 GB Buffer를 추가한 뒤, 2배 부피의 Ethanol을 추가하여 AccuPrep^® Binding Column-I에 넣고 원심분리
이후 과정은 AccuPrep^® Genomic DNA Kit 참고

혈액에서 gDNA 추출이 가능한가요?

Whole blood, buffy coat에서 추출이 가능하며, plasma와 serum의 경우, 백혈구가 제거된 시료이기 때문에 gDNA가 거의 없어 추출양이 매우 적습니다.

Circularized viral genome 추출이 가능한가요?

AccuPrep Viral RNA Extraction Kit, MagListo 5M Viral DNA/RNA Extraction Kit를 추천합니다.

Water sample (하수, 오수)에서 gDNA 추출이 가능한가요?

가능합니다. Spin column type의 경우 sample양을 200 µl로 권장하며, sample양이 많을 경우에는 bead type을 권장합니다.

DNA 농축을 위해 elution 볼륨 조절이 가능한가요?

조절 가능하지만 회수율의 차이가 있어 1/10 volume양을 사용한다고 해서 x 10의 농도가 얻어지진 않습니다. 고농도의 많은 양을 원할 경우 별도의 DNA침전법(EtOH 침전법)을 진행할 것을 권장합니다.

Tissue sample 사용 시 수율이 좋지 않습니다.

Proteinase K 처리 후 overnight하는 것을 추천합니다. 그래도 해결되지 않는다면 GB Buffer 처리 후 30분에서 1시간 incubation 권장하며 lysis 후 원심분리 시 13000 rpm에서 1분간 수행합니다.

Kit로 Prep 후 NGS 가능한가요?

가능하지만 QC절차가 필요합니다.

미토콘드리아 DNA 추출 가능한가요?

Total로 추출되며 미토콘드리아 gDNA만 추출하는 키트는 없습니다.

구강상피세포에서 DNA 추출이 가능한가요?

Swab으로 표피세포 채취 후 200 ul의 TL Buffer 또는 1X PBS에 희석하여 Genomic DNA Kit로 추출 가능하며 animal tissue protocol로 진행하면 됩니다.

기타 궁금하신 사항은 sales@bioneer.co.kr 로 문의하여 주시기 바랍니다.

이용후기