AccuPrep® Plasmid Mini Extraction Kit (50 reactions)

제품 개요

특장점

최대 30 µg의 높은 binding capacity를 갖는 silica based DNA binding column 사용
endA+ strain을 위한 Endonuclease A denaturation buffer 제공 (PB Buffer)
Washing buffer에 ethanol이 첨가되어 있어 편리하게 사용 가능

응용 분야

• Gene cloning

• Sequencing

• Transformation

• Transfection

• in-vitro transcription / translation

제품 규격/사양

▶ 제품 규격/사양

Feature	Specification
Starting culture voulme	1 - 10 ml
Preparation time	< 20 min
Elution volume	50 - 100 µl
Expected DNA yield^*	Up to 20 µg
Expected DNA purity	A_260/280 > 1.8

* Plasmid 종류에 따라 측정 값의 차가 있을 수 있습니다.

▶ 구성품

구성품	K-3030 (200 reaction)	K-3030-1 (50 reaction)
PA1 Buffer (Resuspension)	60 ml X 1 ea	15 ml X 1 ea
P2 Buffer (Lysis)	60 ml X 1 ea	15 ml X 1 ea
PA3 Buffer (Neutralization)	80 ml X 1 ea	20 ml X 1 ea
PB Buffer (Endonuclease A denaturation)	75 ml X 1 ea	20 ml X 1 ea
W2 Buffer (Washing)	80 ml X 2 ea	40 ml X 1 ea
EA Buffer (Elution)	25 ml X 1 ea	15 ml X 1 ea
BST Solution	40 ml X 1 ea	10 ml X 1 ea
RNase A powder, lyophilized	6 mg X 1 ea	1.5 mg X 1 ea
AccuPrep^® Binding Column-II plus	200 ea	50 ea
Collection Tube (for filtration)	200 ea	50 ea
사용설명서	1 ea	1 ea

▶ 작업 순서

▶ 실험 자료

accupower

Figure 1. Improved yield.

AccuPrep^® Plasmid Mini Extraction Kit는 high & low copy number 의 plasmid DNA 모두에서 높은 수율을 나타냅니다.

- Lane B; AccuPrep^® Plasmid Mini Extraction Kit
- Lane 2, 3; Competitors

Figure 2. Restriction enzyme digestion test.

200 ng of extracted plasmid DNA (pBluescript SK(+)) was digested with XbaI. Each enzymes completely recognize its restriction enzyme site and digest.

- Lane M; Molecular weight marker (λDNA/HindIII + EcoRI, Cat. No. D-1070, Bioneer)
- Lane 1; AccuPrep^® Plasmid Mini Extraction Kit
- Lane 2, 3; Competitors

200 ng of extracted plasmid DNA (pBluescript SK(+)) was digested with various restriction enzymes. Each enzymes completely recognize its restriction enzyme site and digest.

- Lane M; Molecular weight marker (λDNA/HindIII + EcoRI, Cat. No., D-1070, Bioneer)
- K; Kpn I            - X; Xho I
- SI; Sal I             - H; Hind III
- E; EcoR I           - P; Pst I
- Sm; Sma I        - B; Bam HI
- S; Spe I             - Xb; Xba I
- N; Not I            - Sc; Sac I

◈ Quality Assurance

Bioneer is the holder of Quality Management System Certificates for the following standards.

• ISO 9001 – certificate

주문 정보

카탈로그 번호	제품명	규격	가격
K-3030-1	AccuPrep^® Plasmid Mini Extraction Kit	50 reactions	₩K-3030-1
K-3030	AccuPrep^® Plasmid Mini Extraction Kit	200 reactions	₩K-3030
KB-0101	RNase A Powder	6 mg	₩KB-0101

자주 묻는 질문들

Buffer를 추가 구매할 수 있나요?

각 buffer에 대해 추가 구매는 가능하지만 권장하지 않습니다. 제품 유효기간 관리도 어려워 성능이 떨어진 제품을 사용할 수도 있고, 중간에 제품 리뉴얼이 되면 구성이 변경될 수도 있습니다. Midi와Maxi 제품의 경우, buffer 추가적으로 판매하고 있지 않습니다(Column은 별도 구매 가능하지만 Midi와 Maxi 제품의 Syringe Filter는 별도 구매 불가능합니다.)

EA Buffer의 조성은 어떻게 되나요?

10 mM Tris-HCl (pH 8.0) 입니다. 기타 buffer에 대한 조성확인은 홈페이지 제품 페이지의 관련 문헌/자료 탭의 MSDS에서 확인 가능합니다.

서로 다른 Extraction Kit 간에 buffer 및 column의 교차 사용이 가능한가요?

Buffer명이 같다면 동일 제품으로 kit가 달라도 교차 사용이 가능합니다.

RNase A는 어떻게 녹이나요?

Resuspension Buffer (예: PA1, PNA1, PM1)로 powder를 녹인 후, Resuspension buffer에 첨가하여 사용하면 됩니다. Buffer에 RNase A를 첨가한 후에는 4°C에서 보관해야 하며, 6개월 이내에 사용을 권장 드립니다. 자세한 사항은 제품 매뉴얼을 참고해주시기 바랍니다.

타사의 RNase A를 사용해도 되나요?

호환하여 사용 가능하지만, Unit을 확인하시기 바랍니다.

RNase A는 별도 구매가 가능한가요?

가능합니다. 별도 구매시에는 6 mg x 1 ea로 제공되며 Cat. No는 KB-0101입니다.

타사의 Elution 버퍼를 사용해도 되나요?

TE buffer (pH 8.0)라면 사용 가능합니다.

AccuPrep^® Plasmid Mini Extraction Kit, AccuPrep^® Nano-Plus Plasmid Mini Extraction Kit, MagListo™ 5M Plasmid Extraction Kit의 차이점은 무엇인가요?

Nano-Plus 제품의 경우 Resuspension Buffer (PNA1 buffer)에 나노실리카입자가 포함되어 있어, resuspension 시간과 원심 분리하는 시간을 줄일 수 있어 실험시간이 단축되지만, 두 제품간의 수율 차이는 없습니다.

보관 온도와 유효기간은 어떻게 되나요?

RNase A를 첨가한 Resuspension Buffer (PA1, PNA1, PM1 Buffer)를 제외한 나머지 구성품은 상온에서 보관하며, 유효기간은 2년입니다. 유효기간은 제품 라벨에 표기되어 있습니다.

PNA1 버퍼에 불투명한 침전물이 보입니다. 사용해도 되나요?

Nano particle이 보이는 것으로 잘 흔들어서 사용하시면 됩니다.

Lysis Buffer에서 하얀색 덩어리가 보입니다. 사용해도 되나요?

Lysis Buffer의 경우 salt가 고농도로 들어 있어, 통 안에서 생겼을 경우 온도가 낮아 일어나는 현상이며, 입구 주변에서 결정이 확인되는 건 용액 샘 현상으로 발생되는 것입니다. 성능에는 이상 없습니다.

Gram-positive bacteria에서 plasmid 추출이 가능한가요?

Lysozyme을 이용하여 전처리하면 가능합니다.

Yeast에서 plasmid 추출이 가능한가요?

해당 Kit는 없으나, Zymolyase를 이용하여 전처리하면 가능합니다.

100 kb 이상의 plasmid DNA도 추출이 되나요?

해당 데이터는 없습니다.

BST solution의 역할은 무엇인가요?

Column activation을 위해 사용합니다.

DNA yield/purity가 너무 낮습니다.

우선 Buffer 확인을 부탁드리며, Resuspension Buffer로 완전히 resuspension 되었는지 여부와 Lysis Buffer, Neutralization Buffer 사용 후 precipitation이 완전히 re-dissolve되었는지 확인해야 합니다.

A₂₆₀/₂₈₀ 값이 2.0이상 나옵니다.

RNase activity가 감소했을 가능성이 있습니다. RNase A를 다시 첨가하여 사용하시는 것을 권장합니다.

전기영동에서 여러 밴드가 확인됩니다.

Chromosomal DNA 오염에 의한 것이며 Neutralization 단계에서 vortex를 심하게 하거나 5분 이상 진행할 경우 이러한 현상이 나타날 수 있습니다.

RNA 오염이 확인됩니다.

RNase를 넣은 후 6개월 이상 경과하면, RNase activity가 떨어짐으로 추가로 RNase를 더 넣을 것을 권장합니다.

Agarose gel에 sample loading 시, 샘플이 뜨는 현상이 나타납니다.

Ethanol이 남아 있어 나타나는 현상으로, 한번 더 Dry하는 것을 권장합니다.

고농도(1 µg/µl 이상)의 DNA를 얻고 싶습니다. Elution Buffer의 양을 줄이면 되나요?

조절 가능하지만 회수율의 차이가 있어 1/10 volume을 사용한다고 해서 x 10의 농도가 얻어지진 않습니다. 고농도의 많은 양을 원할 경우 별도의 DNA침전법(EtOH 침전법) 권장합니다.

Plasmid 추출 시, endotoxin이 제거되나요?

제거되지 않으므로 별도의 처리가 필요합니다.

Maxi kit를 이용한 고농도 추출이 가능한가요?

maxi kit의 경우 일반적으로 고농도의 plasmid 추출을 위해 사용하고자 문의하시는 경우가 많으나, 자사의 경우 column type으로 저농도로 추출되어 권장드리지 않습니다. 고농도 추출을 원하시는 경우 Phenol 정제를 이용하거나 얻은 시료의 EtOH 침전법을 이용하길 권장합니다.

기타 궁금하신 사항은 sales@bioneer.co.kr 로 문의하여 주시기 바랍니다.

이용후기