AccuRapid™ TA Cloning kit (20 reactions)

개요

TA Cloning 은 Taq DNA Polymerase에 의해 3’ 말단에 dA-tailing된 DNA를 3’ 말단에 (dT)가 첨가된 ‘T-vector’에 ligation하여 PCR 산물을 직접적으로 cloning 하는 방법입니다. TA Cloning은 제한효소 인지서열이 포함된 primer나, 제한효소 처리 없이도 쉽게 cloning할 수 있는 장점이 있습니다. Bioneer의 AccuRapid™ TA Cloning kit는 3’ 말단에 (dA)를 첨가할 수 있는 Taq DNA Polymerase 로부터 증폭된 PCR 산물을 선형화된 T-vector에 쉽고 빠르게 cloning 할 수 있는 제품입니다.

특장점

빠르고 정확한 cloning

15분 반응으로 짧은 시간 안에 다양한 크기의 insert DNA 클로닝 가능
Blue/white screening
LacZα 유전자를 통해 blue/white 선별기능을 제공
편리한 Insert 분리
BamH I poly-linker 를 활용한 insert 분리
편리한 Sequencing
M13 primer site 를 사용한 sequencing 가능

제품 규격/사양

▶ 구성품

구성품	농도	부피
pBHA-T vector	25 ng/μl	40 μl
Control Insert	70 ng/μl	20 μl
AccuRapid™ 2X Reaction Buffer	-	100 μl
T4 DNA Ligase	200 U/μl	20 μl
보관온도: -20^oC

▶ 벡터 맵

▶ 실험 자료

Figure 1. Comparison of clones harboring correct insert after TA Cloning between AccuRapid™ TA cloning kit and other supplier’s TA cloning kit.

The AccuRapid™ TA cloning system gave a high number of recombinants clone across a broad range of insert sizes (500bp – 2,000bp).

Figure 2. The restriction enzyme digestion of recombinant plasmids which obtained by AccuRapid™ TA Cloning kit.

M: 1kb DNA ladder
1 : pBHA-T vector
2 : Insert 1 (500 bp)
3 : Insert 2 (1,000 bp)
4 : Insert 3 (2,000 bp)
5 : Digested with BamH I (pBHA-T haboring Insert 1)
6 : Digested with BamH I (pBHA-T harboring Insert 2)
7 : Digested with BamH I (pBHA-T harboring Insert 3)
The AccuRapid™ TA Cloning kit provides a versatile polylinker with flanking BamH I sites for easy excision of inserts

◈ Quality Assurance

Bioneer is the holder of Quality Management System Certificates for the following standards.

• ISO 9001 – certificate

주문 정보

▶ 주문 정보

카탈로그 번호	제품명	규격
K-7170	AccuRapid™ TA Cloning Kit	20 reactions

자주 묻는 질문들

AccuRapid™ Cloning Kit와 AccuRapid™ TA Cloning Kit의 차이는 무엇인가요?

	AccuRapid™ Cloning Kit	AccuRapid™ TA Cloning Kit
Cloning 방향성	설정 가능	설정 불가능
Primer의 추가 sequence	양쪽 primer 말단에 18-20 bp의 vector complementary sequence 추가해야 함	별도의 sequence 추가 필요 없음
제한 효소 처리 유무	사용자가 vector를 잘라야하지만 원하는 vector에 cloning 가능	별도의 제한효소 처리를 할 필요 없으나 제공되는 vector에만 cloning 가능
여러 단편의 DNA cloning	3 조각까지 한번에 assembly 가능	DNA assembly 불가
반응 시간	30 min	15 min

1 kb 이상의 insert를 TA Cloning 하고싶지만 PCR error가 걱정돼요.

1 kb 이상의 insert를 TA Cloning 할 때는 자사 AccuPower^® ProFi Taq PCR Kit를 추천드립니다.
ProFi Taq PCR Kit는 A-tailing이 가능하면서 proofreading 기능을 가지고 있습니다. 또한 증폭효율이 좋아 긴 DNA도 정확히 증폭 가능합니다.

Sequencing primer는 어떤 것을 사용하면 되나요?

T7 promoter, SP6, M13F(-40), M13R(-40), M13F(-20), M13F(-20)을 사용할 수 있습니다.

Primer name	Sequence (5' --> 3')	Length [bases]
T7promoter	TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG	20
SP6	ATT TAG GTG ACA CTA TAG	18
M13F(-40)	GTT TTC CCA GTC ACG AC	17
M13R(-40)	CAG GAA ACA GCT ATG AC	17
M13F(-20)	GTA AAA CGA CGG CCA GT	17
M13R(-20)	GCG GAT AAC AAT TTC ACA CAG G	22

제한효소 하나만을 이용하여 Insert DNA를 분리하고 싶어요.

BamHI을 이용하시면 원하는 insert를 분리할 수 있습니다.

Figure 1. The restriction enzyme digestion of recombinant plasmids which obtained by AccuRapid™ TA Cloning kit.

M: 1kb DNA ladder
1 : pBHA-T vector
2 : Insert 1 (500 bp)
3 : Insert 2 (1,000 bp)
4 : Insert 3 (2,000 bp)
5 : Digested with BamH I (pBHA-T haboring Insert 1)
6 : Digested with BamH I (pBHA-T harboring Insert 2)
7 : Digested with BamH I (pBHA-T harboring Insert 3)
The AccuRapid™ TA Cloning kit provides a versatile polylinker with flanking BamH I sites for easy excision of inserts

Ligase만 추가로 구매하고 싶어요.

자사 T4 DNA Ligase를 추가로 구매하여 사용하시면 됩니다.

기타 궁금하신 사항은 sales@bioneer.co.kr 로 문의하여 주시기 바랍니다.

이용후기

AccuRapid™ TA Cloning kit (20 reactions)

개요

특장점

▶ 구성품

▶ 벡터 맵

▶ 실험 자료

◈ Manual

◈ MSDS

◈ Flyer

◈ Quality Assurance

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