PreMix는 PCR 수행에 필요한 materials이 1회 분량씩 PCR tube에 진공 건조되어 있어 사용이 편리하며, 실험 시 반복적인 pipetting으로 인한 contamination 및 error를 줄여 재현성이 높습니다. 또한, 안정화 물질이 포함되어 있어 solution type 제품보다 안정성이 뛰어납니다. Master Mix는 액상타입으로 reaction volume 조정이 용이하며 장비 호환성이 높습니다.
AccuPower® Dual-HotStart™ RT-PCR PreMix(with UDG)
AccuPower® Dual-HotStart™ RT-PCR PreMix (with UDG)는 Pyro-Hotstart RT 기술과 Hotstart PCR 기술을 적용하여, 비특이적 역전사반응의 문제점들을 근본적으로 개선한 one-step RT-PCR 제품입니다. 극미량 또는 2차 구조를 갖는 template RNA에서도 효과적으로 cDNA를 합성할 수 있으며, Uracil DNA glycosylase system 적용으로 carryover contamination을 방지합니다. 각 tube에 1회 사용 분량이 분주되어 있어 master mix 제품의 반복사용으로 인한 cross contamination을 방지할 수 있으며, RT-PCR 수행에 필요한 모든 성분을 포함하고 있어 template RNA, primers 및 D.W.만 첨가함으로써 RT-PCR 반응을 수행할 수 있습니다.
개요
특장점
- Carryover contamination 방지
Uracil DNA glycosylase system 적용으로 반복적인 PCR 실험으로 인해 공기 중에 남아있던 산물이 유입되어 나타나는 carryover contamination을 방지합니다. Uracil DNA Glycosylase (UDG)는 DNA 가닥 내 uracil과 deoxyribose간의 N-glycosylic bond를 가수분해 함으로써 uracil이 삽입된 template을 제거합니다. UDG는 PCR cycling 전 37℃에서 2분 반응을 통해 활성화되어, uracil이 들어간 DNA를 제거하므로 공기 중 남아있던 산물의 유입에 의한 carryover 오염을 방지할 수 있으며, PCR cycling 중 고온에서 불활성화됩니다.
- 특이성
Pyro-Hotstart RT 반응과 Hotstart PCR 을 이용한 세계 최초 Dual-HotStart ™ RT-PCR 반응은 target 유전자 만을 정확하게 검출할 수 있도록 최적화된 제품입니다.
응용 및 적용
• Low copy viral/bacterial pathogen load determination in an earlier stage
• Low copy mRNA amplification
• Low copy target RNA quantification
• RNA amplification for microarray and NGS
실험 자료
Figure. Sensitivity of AccuPower® Dual-Hotstart ™ RT-PCR PreMix(with UDG).