PreMix는 PCR 수행에 필요한 materials이 1회 분량씩 PCR tube에 진공 건조되어 있어 사용이 편리하며, 실험 시 반복적인 pipetting으로 인한 contamination 및 error를 줄여 재현성이 높습니다. 또한, 안정화 물질이 포함되어 있어 solution type 제품보다 안정성이 뛰어납니다. Master Mix는 액상타입으로 reaction volume 조정이 용이하며 장비 호환성이 높습니다.
AccuPower® Dual-HotStart™ RT-qPCR PreMix & Master Mix
AccuPower® Dual-HotStart™ RT-qPCR PreMix는 HotStart 역전사 기술을 적용하여, 비특이적 역전사반응의 문제점들을 근본적으로 개선한 Hydrolysis probe 방식의 one-step RT-qPCR 제품입니다. Target RNA만 선택적으로 역전사하므로 민감도가 획기적으로 개선되어 극미량의 template RNA에서도 효과적으로 합성할 수 있습니다. 또한 Exicycler™ 96 장비 및 타 회사 장비 등에 최적화된 종류의 tube 및 plate가 제공되며, 2X Master mix type으로도 제공이 가능합니다.
개요
특장점
- 특이성
PyroHotStart RT 반응과 HotStart PCR을 이용한 세계 최초 Dual-HotStart ™ RT-qPCR 반응은 정확히 target 유전자만을 검출할 수 있도록 최적화되었습니다.
- 민감도
일반적으로 검출이 불가능한 극 미량의 target template가 고농도의 RNA에 포함되어 있는 시료에 대해서도 검출 가능하며, 10 ~ 1010 copies까지 10 log의 넓은 dynamic range를 갖습니다.
- Multiplexing
여러 종류의 형광 dye (probe) 와 호환성이 뛰어나 여러 종류의 target gene 을 검출할 수 있습니다.
- 다양한 Template RNA 검출 가능
RocketScript ™ RTase 가 포함되어 있어 고온에서 RT반응이 가능하며, RNA 2차구조가 강하게 형성된 template RNA등에서도 유효한 정량 RT-qPCR 결과를 얻을 수 있습니다.
- 다양한 시료에 적용 가능
다양한 종류의 PCR inhibitor 를 포함하고 있는 혈액, 토양 시료의 template RNA에서도 뛰어난 반응성을 갖고 있어 다양한 시료에서도 정확한 RT-qPCR 결과를 얻을 수 있습니다.
- 편리성
RocketScript ™ RTase, HotStart Taq DNA polymerase 및 cDNA 합성과 qPCR에 필요한 모든 구성 성분이 포함되어 있어, template RNA, primers & probe, D.W.만 넣어 one-step RT-qPCR을 수행할 수 있습니다.
- 안정성
PCR 반응 혼합물에 안정화제를 첨가하여, -20℃에서 2년까지 효소 활성이 안정적으로 유지됩니다.
- 재현성
ISO 9001 품질 시스템 하에서 대량 생산되어 lot 간 편차가 최소화 되었으며, 반복적인 실험에도 재현성 있는 실험 결과를 제공합니다.
응용 및 적용
• Gene expression profiling
• Target RNA quantification
• Microbial detection
• Viral/bacterial pathogen load determination
실험 자료
Figure. High sensitivity of AccuPower® Dual-HotStart ™ RT-qPCR PreMix.
Experiment with HIV target. 10 fold serial dilution of Template RNA (1010 copies ~ 10 copies spiked in Human Total RNA).