1 vial에 들어있는 25 mg의 Proteinase K를 1.25 ml의 nuclease-free water에 용해 후, 1 rxn 당 20 µl씩 사용합니다. 용해 후에는 4℃에서 보관해야 하며, 장기보관 시, 소량 분주하여 -20°C에서 보관을 권장 드립니다. 자세한 사항은 제품 매뉴얼을 참고해주시기 바랍니다.
MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit (100 reactions)
MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit 는 Magnetic Nanobead가 적용된 제품으로서 Magnetic Separation Rack을 이용하여 혈액, 동물 조직, 배양 세포로부터 genomic DNA를 빠르게 추출할 수 있는 제품입니다. 추출된 genomic DNA는 gene cloning, PCR, Quantitative real time PCR, southern blotting 등 다양한 실험에 사용할 수 있습니다.
Magnetic bead 방식
특장점
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Blood, Cultured cell, Animal Tissue, Bacteria (Gram (-), (+)) 등 다양한 시료로부터 genomic DNA추출 가능
-
104 cell 이하의 소량 샘플에서도 genomic DNA 추출 가능
-
Mini, Midi, Maxi scale을 하나의 kit로 사용 가능 (Mini-5분, Midi-10분, Maxi-15분 만에 추출)
-
Extraction Kit와 MagListo™ Magnetic Separation Rack 외에 고가의 추가 장비 불필요
응용 분야
• Gene cloning
• PCR
• Real-time PCR
• Southern blotting
• SNP genotyping
▶ 제품 규격/사양
Scale | Mini (typical yield (μg)) |
Midi (typical yield (μg)) |
Maxi (typical yield (μg)) |
Whole blood | 200 μl (< 10 μg) | 2 ml (< 80 μg) | 4 ml (< 150 μg) |
Cultured cell | Up to 1 x 106 (< 12 μg) | Up to 5 x 106 (< 60 μg) | Up to 1 x 107 (< 120 μg) |
Animal tissue | Up to 25 mg (< 10 μg) | Up to 100 mg (< 40 μg) | Up to 250 mg (< 120 μg) |
Bacteria (Gram (-), (+)) | Up to 1 x 109 (< 15 μg) | Up to 5 x 109 (< 80 μg) | Up to 1 x 1010 (< 150 μg) |
Expected purity | A260/280 > 1.8 |
* 시료의 종류에 따라 측정 값의 차가 있을 수 있습니다.
▶ 구성품
구성품 | K-3603* |
TL Buffer | 35 ml x 1 ea |
GB Buffer | 30 ml x 1 ea |
WM1 Buffer | 60 ml x 1 ea |
W2 Buffer | 80 ml x 1 ea |
WE Buffer | 120 ml x 1 ea |
EA Buffer | 25 ml x 1 ea |
RNase A powder, lyophilized | 24 mg x 2 ea |
Proteinase K, lyophilized | 25 mg x 2 ea |
Magnetic Nanobead | 11 ml x 1 ea |
사용설명서 | 1 ea |
* mini-100 rxn, midi-15 rxn, maxi-7 rxn
▶ 실험 자료
M; Bioneer 1 kb ladder |
Figure 1. Comparison of genomic DNA from human whole blood (200 μl) purified with MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit and competitor’s kit (single column type).
M; Bioneer 1 kb ladder |
Figure 2. Genomic DNA from 100 μl and 1 ml of human whole blood purified with MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit.
M; Bioneer 1 kb ladder |
Figure 3. Genomic DNA from 200 μl and 4 ml of human whole blood purified with MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit.
M; Bioneer 1 kb ladder |
Figure 4. Comparison of genomic DNA from HeLa cell (1 x 106) purified with MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit and competitor’s kit (single column type).
M; Bioneer 1 kb ladder |
Figure 5. Genomic DNA from 1x106 and 5x106 of HeLa cell purified with MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit.
M; Bioneer 1 kb ladder |
Figure 6. Comparison of genomic DNA from bovine skeletal muscle tissue (15 mg) purified with MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit and competitor’s kit (single column type).
M; Bioneer 1 kb ladder |
Figure 7. Genomic DNA from 20 mg, 100 mg and 250 mg of porcine skeletal muscle tissue purified with MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit.
M; Bioneer 1 kb ladder |
Figure 8. Comparison of genomic DNA from E. coli purified with MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit and competitor’s kit (single column type).
Figure 9. Comparison of real-time qPCR data of genomic DNA from HeLa cell (1 x 101 - 1 x 105) purified with MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit and competitor’s kit (single column type).
A. Amplication curve of GAPDH from HeLa cell (1 x 101 - 1 x 105) genomic DNA purified with Bioneer
MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit. The premix used was Accupower® Plus DualStar™ qPCR
PreMix (K-6600).
B. Comparison of standard curves from qPCR results using genomic DNA purified with Bioneer MagListo™
Genomic DNA Extraction Kit and competitor Q kit.
Figure 10. Comparison of DNA extraction time from blood (200 μl) purified with MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit and competitor’s kit (single column type).
N: Number of sample
Figure 11. Comparison of DNA extraction time from blood purified with MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit.
N: Number of sample
◈ Manuals
• Manual_MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit
• Onepage protocol_MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit
• Onepage protocol_MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit for ExiPrep™96 Lite
◈ MSDS
• MSDS_MagListo™ Genomic DNA Extraction Kit TL Buffer KR ver.2.pdf
• MSDS_MagListo™ Genomic DNA Extraction Kit GB Buffer KR ver.2.pdf
• MSDS_MagListo™ Genomic DNA Extraction Kit WM1 Buffer KR ver.2.pdf
• MSDS_MagListo™ Genomic DNA Extraction Kit W2 Buffer KR ver.2.pdf
• MSDS_MagListo™ Genomic DNA Extraction Kit WE Buffer KR ver.2.pdf
• MSDS_MagListo™ Genomic DNA Extraction Kit EA Buffer KR ver.2.pdf
• MSDS_MagListo™ Genomic DNA Extraction Kit Proteinase K KR ver.7.pdf
• MSDS_MagListo™ Genomic DNA Extraction Kit RNase A KR ver.6.pdf
• MSDS_MagListo™ Genomic DNA Extraction Kit Magnetic Nano Bead KR ver.1.pdf
◈ Brochure/Flyer
• MagListo™ nucleic acid extraction kit series
• Automation of Nucleic acid extraction using ExiPrep™96 Lite
◈ Quality Assurance
Bioneer is the holder of Quality Management System Certificates for the following standards.
▶ 주문 정보
카탈로그 번호 | 제품명 | 규격 |
K-3603 | MagListo™ 5M Genomic DNA Extraction Kit | 100 reactions |
▶ 관련 제품
카탈로그 번호 | 제품명 | 규격 |
TM-1010 | MagListo™-2 Magnetic Separation Rack | 2 ml tube x 8 holes |
TM-1020 | MagListo™-15 Magnetic Separation Rack | 15 ml tube x 6 holes |
TM-1030 | MagListo™-50 Magnetic Separation Rack | 50 ml tube x 3 holes |
사용 가능하며, final concentration 맞춰서 사용해야 합니다.
10 mM Tris-HCl (pH 8.0) 입니다. 기타 buffer에 대한 조성확인은 홈페이지 제품 페이지의 관련 문헌/자료 탭의 MSDS에서 확인 가능합니다.
GB buffer 처리 후 ethanol 첨가 전에서 냉동 가능하며(-80°C), WA1 buffer 처리 후 냉장보관이 가능합니다(짧은 시간 보관 시 추천).
Xylene을 이용하여 전처리 후, animal tissue protocol로 DNA 추출이 가능합니다.
Gram-negative, gram-positive 박테리아 모두 가능합니다. Gram-positive 박테리아의 경우, 별도의 Lysis Buffer가 필요하며 lysozyme 전처리 후 추출 가능합니다(Lysis buffer 조성: 20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 2 mM EDTA, 1.2% Triton® X-100/Lysozyme dissolve solution: D.W.).
Gram-positive박테리아의 세포벽의 주성분인 peptidoglycan을 분해하기 위해 lysozyme이 필요합니다.
AccuPrep®/MagListo™ Plant genomic DNA Extraction kit를 활용할 수 있으며, zymolyase(Lyticase)를 통한 전처리 후에 추출 가능합니다. (zymolyase(Lyticase)은 fungi cell wall의 주성분인 β-glucan을 분해합니다)
Zymolyase를 이용하여 전처리 후, 추출 가능합니다. (Zymolyase(Lyticase)은 fungi cell wall의 주성분인 β-glucan을 분해합니다)
동물 플랑크톤은 AccuPrep®/MagListo™ Genomic DNA Extraction Kit의 animal tissue protocol로 추출 가능하며, 식물 플랑크톤은 AccuPrep®/MagListo™ Plant Genomic DNA Extraction Kit를 사용하여 추출 가능합니다.
현재 자사에는 가능한 제품이 없습니다만
- TL Buffer를 토양과 동일 부피로 혼합한 뒤, Proteinase K를 (400 ug) 넣고, 10분 이상 60℃에서 가열
- 혼합물과 동일 부피의 Phenol/chloroform/isoamyl alcohol을 넣고 1분간 vortex하여 혼합
- 상층액만 분리하여, 동일부피의 GB Buffer를 추가한 뒤, 2배 부피의 Ethanol을 추가하여 AccuPrep® Binding Column-I에 넣고 원심분리
- 이후 과정은 AccuPrep® Genomic DNA Kit 참고
Whole blood, buffy coat에서 추출이 가능하며, plasma와 serum의 경우, 백혈구가 제거된 시료이기 때문에 gDNA가 거의 없어 추출양이 매우 적습니다.
AccuPrep Viral RNA Extraction Kit, MagListo 5M Viral DNA/RNA Extraction Kit를 추천합니다.
가능합니다. Spin column type의 경우 sample양을 200 µl로 권장하며, sample양이 많을 경우에는 bead type을 권장합니다.
조절 가능하지만 회수율의 차이가 있어 1/10 volume양을 사용한다고 해서 x 10의 농도가 얻어지진 않습니다. 고농도의 많은 양을 원할 경우 별도의 DNA침전법(EtOH 침전법)을 진행할 것을 권장합니다.
Proteinase K 처리 후 overnight하는 것을 추천합니다. 그래도 해결되지 않는다면 GB Buffer 처리 후 30분에서 1시간 incubation 권장하며 lysis 후 원심분리 시 13000 rpm에서 1분간 수행합니다.
가능하지만 QC절차가 필요합니다.
Total로 추출되며 미토콘드리아 gDNA만 추출하는 키트는 없습니다.
Swab으로 표피세포 채취 후 200 ul의 TL Buffer 또는 1X PBS에 희석하여 Genomic DNA Kit로 추출 가능하며 animal tissue protocol로 진행하면 됩니다.
기타 궁금하신 사항은 sales@bioneer.co.kr 로 문의하여 주시기 바랍니다.