PreMix는 PCR 수행에 필요한 materials이 1회 분량씩 PCR tube에 진공 건조되어 있어 사용이 편리하며, 실험 시 반복적인 pipetting으로 인한 contamination 및 error를 줄여 재현성이 높습니다. 또한, 안정화 물질이 포함되어 있어 solution type 제품보다 안정성이 뛰어납니다. Master Mix는 액상타입으로 reaction volume 조정이 용이하며 장비 호환성이 높습니다.
AccuPower® RocketScript™ RT-PCR PreMix & Master Mix
AccuPower® RocketScript™ RT-PCR PreMix는 바이오니아가 개발한 Thermostable RTase (RocketScript™ Reverse Transcriptase)와 ProFi Taq DNA polymerase, dNTP, reaction buffer 등을 진공 건조시킨 one-step RT-PCR 제품입니다. RocketScript™ Reverse Transcriptase를 이용하여 고온에서 RT반응을 수행함으로써 RNA 2차 구조가 강하게 형성된 template RNA에서도 효과적으로 RT-PCR product을 얻을 수 있습니다. 또한 신장성과 민감도가 높으며 cDNA 합성에 필요한 모든 구성 물질 및 전기영동에 필요한 tracking dye와 침강제가 포함되어 있어, 증폭하고자 하는 RNA, primer 및 D.W.만을 첨가하여 바로 RT-PCR 반응을 수행할 수 있습니다.
특장점
- Long kb RT-PCR
Human total RNA 100 ng으로 full-length size가 5.2 kb (target: human TFRC) target도 one-step RT-PCR이 가능합니다.
- 민감도
AccuPower® RocketScript ™ RT-PCR PreMix는 cell, tissue 등에서 추출한 human total RNA의 10 pg (target: ß-Actin)에서도 one-step RT-PCR이 가능한 제품입니다.
- 열 안정성
70℃에서도 활성을 갖는 뛰어난 열안정성의 RocketScript ™ RTase 적용으로 2차 구조 RNA의 cDNA 합성에 적합합니다. cDNA 합성 온도는 42 ~ 70℃까지 고객의 실험 조건에 맞게 다양한 온도로 설정할 수 있어 효과적으로 cDNA를 합성할 수 있습니다.
Note: Schematic representation of the 5'UTR of a gene, with complex secondary structure, at three different temperatures. Note that RocketScript™ shows full activity at 70℃ allowing it to synthesize the complete gene sequence where M-MLV and other reverse transcriptase's fail.
- 재현성
ISO 9001 품질 시스템 하에서 대량 생산되어 lot 간 편차가 최소화 되었으며, 반복적인 실험에도 재현성 있는 실험 결과를 제공합니다.
- 편리성
Thermostable reverse transcriptase, RNase inhibitor 등 cDNA 합성에 필요한 모든 구성 물질이 포함되어 있어, 증폭하고자 하는 RNA, primer 및 D.W.만을 첨가하여 바로 RT-PCR 반응을 수행할 수 있습니다. 또한, 전기영동에 필요한 tracking dye 및 침강제가 포함되어 있어 별도로 loading buffer를 넣을 필요가 없습니다.
응용 및 적용
• First-strand synthesis of cDNA from RNA molecules (RT)
• RT-PCR
• cDNA library construction
• Gene expression analysis
실험 자료
Figure. Performance comparison between AccuPower® RocketScript ™ RT-PCR PreMix and competitor RT-PCR kits
Complex secondary structure RNA species amplification by RocketScript ™ is outstanding compared to the leading competitor's reverse transcriptase. RT reactions were performed according to each manufacturer's recommendations.
Lanes 1-4 are 10 ng, 1 ng, 0.1 ng and 0.01 ng of total RNA from HeLa cells, respectively