HotStart DNA Polymerase
PCR에 필수적인 Mg2+를 Pyro-phosphate (PPi)로 불활성화시키고, 다시 PCR반응을 진행하면서 내열성 Pyro-phosphatase (PPase)에 의해 PPi를 분해하는 개념의 HotStart DNA polymerase입니다.
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카탈로그 번호
▶ HotStart DNA Polymerase의 원리
Pyro-phosphate (PPi)와 pyro-phosphatase (PPase)의 화학반응을 이용한 신개념의 HotStart DNA Polymerase입니다.
2가 양이온인 magnessium (Mg2+)은 PCR에서 중요한 역할을 합니다. Mg2+는 Pyro-phosphate (PPi)와 결합하여 complex를 형성하게 되며, Mg-PPi complex는 PCR반응을 저해하게 됩니다. PCR반응 중 내열성 Pyro-phosphatase (PPase)에 의해 Mg-PPi complex가 Mg2+와 2Pi로 분해되어 정상적인 PCR이 진행됩니다. 또한, PCR 부산물인 PPi를 2Pi로 분해하여 PCR 반응성을 증가시킬 수 있습니다.
2가 양이온인 magnessium (Mg2+)은 PCR에서 중요한 역할을 합니다. Mg2+는 Pyro-phosphate (PPi)와 결합하여 complex를 형성하게 되며, Mg-PPi complex는 PCR반응을 저해하게 됩니다. PCR반응 중 내열성 Pyro-phosphatase (PPase)에 의해 Mg-PPi complex가 Mg2+와 2Pi로 분해되어 정상적인 PCR이 진행됩니다. 또한, PCR 부산물인 PPi를 2Pi로 분해하여 PCR 반응성을 증가시킬 수 있습니다.
특장점
- 높은 민감도 및 특이성
상온에서의 DNA polymerase 활성을 억제하여 PCR 반응물을 혼합하는 동안 형성될 수 있는 비특이 반응물 및 primer-dimer의 생성이 억제됩니다.
- 수득률 향상
높은 민감도와 특이성으로 인해 target DNA의 수득률을 향상시킬 수 있습니다.
- 재현성
ISO 9001 품질시스템 하에서 생산되어 각 batch에 대한 균일한 품질의 제품이 공급되기 때문에 재현성 있는 결과를 얻을 수 있습니다.
응용 및 적용
- HotStart PCR, PCR with complex genomic templates/low copy templates/cDNA
- Multiplex PCR
- Primer extension
- SNP typing
- Real-time PCR using dsDNA Binding dye
- Multiple primer pairs and amplification of low copy template DNA
실험 자료
Figure. Multiplex PCR comparison of genomic DNA using 6 sets of primers.
Lane M : 100 bp DNA Ladder (Bioneer, Cat. No. D-1030)
Lane 1 : 750 bp fragment
Lane 2 : 590 bp fragment
Lane 3 : 450 bp fragment
Lane 4 : 360 bp fragment
Lane 5 : 260 bp fragment
Lane 6 : 150 bp fragment
Lane 7 : Multiplex PCR with primers used for Lane 1 – 6