Exicycler™ 96
Exicycler™ 96 Real-Time Quantitative Thermal Block은 자체 특허인 균일한 여기광을 조사하는 LT(Light Tunnel) 기술과 편광을 이용한 여기광 차단방식, 2-D sensor를 이용한 96 well 동시 검출기술로 광학적 민감도와 well 별 편차를 최소화한 실시간 유전자 증폭 장비 입니다. Thermal block은 standard 96 well format으로 설계되어 standard type의 0.2ml PCR tube(white type)을 사용할 수 있어 사용자 편의성을 증대시켰습니다.
개요
광학 특허 기술
바이오니아의 특허인 편광을 이용한 형광 검출 방식(한국등록특허 제10-1089045호, 미국등록특허 US 8427643)을 적용하여 반사광에 의한 노이즈*를 최소화하여 민감도와 정확도가 향상되었습니다.
Figure. 특허 기술에 의한 형광 반사광 차단
* 반사광에 의한 노이즈: qPCR에 이용되는 형광물질은 여기광 (Excitation energy)을 받아 여기상태가 되었다가 기저상태로 떨어지면서 형광을 발하게 됩니다 (emission). 일반적인 qPCR 장비에서는 형광물질 (fluorescence dye, reporter dye 등)을 여기시키기 위해 시료로 조사된 여기광의 일부가 plate 및 기구 내부 표면에서 반사되면서 시료에서 발생된 형광과 함께 형광 검출 장치로 입사됩니다. 일반적으로 형광필터 (band pass filter)로 이들 반사광을 제거하게 되지만, 여기광의 광량이 형광량에 비해 대단히 크기 때문에, 이에 비례하여 반사광의 광량 또한 상당히 커서 형광필터로 완벽하게 제거하지 못하여 시료의 형광 검출시 제거되지 못한 반사광이 노이즈를 발생시켜 민감도와 정확도를 떨어뜨리는 요인으로 작용합니다. 이러한 문제점을 Exicycler ™ 96 qPCR 장비에서는 여기광과 형광을 서로 다른 극성의 편광을 갖도록 유도하는 특허기술이 적용되어, 형광필터에 의해 제거되지 못한 반사광을 편광필터로 한번 더 걸러주어 타 장비에 비해 detector 로 입사되는 반사광에 의한 노이즈를 감소시켰습니다.
특장점
- 96 well 동시측정으로 well 간 편차를 최소화한 광학계
균일한 여기광을 조사하는 LT(Light Tunnel) 기술 (한국특허등록 KR 0794703, 미국등록특허 US 8139210, 일본등록특허 JP 4751821, 중국등록특허 CN 1798969) 과 편광을 이용한 여기광 차단방식 (한국등록특허 제10-1089045호, 미국등록특허 US 8427643), 2-D sensor를 이용한 96 well 동시 검출기술 로 광학적 민감도와 well 별 편차를 최소화하여 재현성이 높고 정확한 결과를 얻을 수 있습니다.
- 빠른 Ramp rate로 반응시간 단축
독창적인 thermal block과 온도 제어 기술을 적용하여 최대 ramping rate 4.5 ℃/sec (Exicycler ™ 96 Fast: max 5.0 ℃/sec) 구현
- 5 color multiplexing system
균일한 광학계 특허기술 (한국특허등록 KR 0794703, 미국등록특허 US 8139210, 일본등록특허 JP 4751821, 중국등록특허 CN 1798969) 로 광량편차 보정을 위해 사용되는 reference dye가 필요하지 않아 5채널의 형광을 모두 시료에 활용할 수 있어 5 타겟을 동시에 검출할 수 있는 multiplex PCR 이 가능합니다.
- 다양한 형광 dye 적용 가능
특정 dye를 사용하도록 되어 있는 타사의 장비와 달리 Excitation/Emission 파장대가 475~690 nm로 넓고, 또한 보편적인 형광dye를 사용할 수 있게 설계되어 있어 실험상의 편의성을 높였습니다.
- 저농도 및 고농도의 시료로 실험 가능
강력한 여기광원인 short Arc 램프를 사용하여 검출 범위가 9 log 이상으로, 저농도 및 고농도의 시료에서도 DNA 정량, 정성 분석이 가능합니다.
- 온도 gradient 기능
20~95℃ 범위에서 1~20℃까지 온도 gradient가 가능하여 최적의 PCR annealing 온도를 한번에 찾을 수 있습니다.
- 다양한 응용 기능
Time increment, Temperature increment 조절기능을 보유하고 있어 touch down PCR과 같은 application이 가능합니다.
- 사용하기 편리한 소프트웨어
사용자 중심의 GUI를 적용하여 편리하고 쉽게 실험을 디자인할 수 있고 결과를 분석할 수 있습니다.
응용 분야
• 유전자발현분석
• MicroRNA 발현 분석
• 유전자 copy수 분석
• 병원균 검출
• 유전변이 검사
• GMO 정량, 정성검사
